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原代心肌细胞的应用 | SCI分享

发布日期:2022-10-28 浏览次数:1066


   随着生命科学技术的进步,越来越多的生物医学实验中采用原代细胞作为材料开展实验研究。相比于细胞系,原代细胞更接近活体内的细胞状态。因此,在体外研究中,以原代细胞作为实验材料得到的实验结果更具有说服力。

   以原代心肌细胞 为例,其作为一种重要的研究模型被广泛应用于心血管研究之中。下面给大家分享一篇采用原代心肌细胞发表的文章。

文章题目:No functional TRPA1 in cardiomyocytes.
研究单位:维也纳医科大学 (生理学和药理学中心、生物医学研究中心、解剖科)
发表时间:   2021年4月5号
发表杂志:Acta Physiologica
影响因子:5.542
采用的原代细胞:原代小鼠心肌细胞


本文概要:目的: 越来越多的证据表明TRPA1在心脏生理和病理生理中起作用。本研究旨在阐明TRPA1在心脏中的表达部位,特别是在通道是否在心肌细胞中表达。方法: 由于TRPA1钙电导率高,并且可以检测到边缘的钙变化,因此,在原代小鼠心肌细胞以及心肌细胞系H9c2和HL-1中进行显微荧光测定。在鼠和人心脏中、原代心肌细胞中、心肌细胞系中检测TRPA1 mRNA表达。以上检测中均以背根神经节作为对照。结果: 除AITC以外,更有效和特异性的TRPA1激动剂JT010和PF-4840154未能在天然和电起搏的原代心肌细胞以及心肌细胞系H9c2和HL-1中引发TRPA1介导的反应。在原代心肌细胞和心肌细胞系中,在细胞分化或炎症条件下TRPA1 mRNA的表达水平也很低,这可能是在病理生理条件下发生的。同样,TRPV1激动剂辣椒素也不会激活原代小鼠心肌细胞,不会改变其中的电起搏活性,也不会激活H9c2细胞或HL-1细胞的自发活性。人多能干细胞分化的心肌细胞也没有相关的TRPA1 mRNA表达。此外,在人类死后的心脏样本中,TRPA1m的RNA水平明显低于各自的背根神经节。结论: 结果表明,我们无需对TRPA1在心脏中的作用有质疑,但排除了其对心肌细胞的直接作用。

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图1:TRPA1或TRPV1激活导致原发性小鼠心肌细胞没有相关的钙瞬变。


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图2:小鼠原发性心肌细胞中的电诱导的钙瞬变物不受TRPA1和TRPV1调节的影响。


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图3:TRPA1和TRPV1激动剂不会影响心脏细胞系HL-1的自发活性。


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图4:在大鼠成肌细胞系H9C2中无功能性TRPA1或TRPV1表达的证据。


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图5:心脏组织和细胞系中定量PCR(qPCR)分析TRPA1或TRPV1表达。